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粗多糖检测
发布时间:2022-04-22
百检网专业从事粗多糖检测,我们平台入驻的检测机构业务覆盖全检测行业。在线一对一服务。检测报告按时按质送到手,坐享报告配送服务。在百检平台上,客户从订购服务到提交委托信息到*后支付检测费用全都可以在线完成,不用出门就可以完成报检流程。接下来为您简单介绍下百检网针对粗多糖检测的检测标准及检测流程。测定方法1. 原理分子量大于10,000道尔顿的多糖经80%乙醇沉淀后,加入碱性铜试剂,选择性地从其他高分
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百检网专业从事粗多糖检测,我们平台入驻的检测机构业务覆盖全检测行业。在线一对一服务。检测报告按时按质送到手,坐享报告配送服务。在百检平台上,客户从订购服务到提交委托信息到*后支付检测费用全都可以在线完成,不用出门就可以完成报检流程。接下来为您简单介绍下百检网针对粗多糖检测的检测标准及检测流程。


测定方法

1. 原理

分子量大于10,000道尔顿的多糖经80%乙醇沉淀后,加入碱性铜试剂,选择性地从其他高分子物质中沉淀出葡聚糖,沉淀部分与苯酚-H2SO4反应,生成有色物质,在485nm条件下,有色物质的吸光度值与葡聚糖浓度成正比。

2. 适用范围

参照AOAC方法。适用于检测含有分子量大于10,000道尔顿葡聚糖的样品。

3.仪器

(1)分光光度计

(2) 离心机

(3) 旋转混匀器

(4)恒温水浴锅

4.试剂

除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。

(1) 80%乙醇:800ml无水乙醇加水200ml。

(2) 2.5 mol/L NaOH溶液:100 g NaOH加蒸馏水稀释至1 L,加入固体无水硫酸钠至饱和。

(3) 铜贮存液:称取3.0 g CuSO4 ·5H2O,30.0 g柠檬酸钠加水溶解至1 L。溶液可贮存2周。

(4) 铜应用溶液:取铜贮存液50 ml,加水50 ml混匀后加入无水硫酸钠12.5 g,临用新配。

(5) 洗涤液:取水50 ml,加入10 ml铜应用溶液,10 ml 2.5 mol/L NaOH溶液,混匀。

(6) 1.8 mol/L H2SO4:取100ml浓硫酸用水稀释至1L。

(7) 20 g/L苯酚溶液:称取2.0g苯酚,加水溶解并稀释至100ml,混匀备用。

(8)葡聚糖标准液:称取500mg葡聚糖(分子量500,000D)于称量皿中,105℃干燥4h至恒重,置于装有干燥硅胶的干燥器中冷却。准确称取100mg干燥后的葡聚糖,用水定容至100ml,葡聚糖标准浓度为1.0mg/ml。

(9) 葡聚糖标准应用液:吸取葡聚糖标准液10ml,用水稀释10倍,葡聚糖终浓度为0.1mg/ml。

5. 操作方法

5.1 样品处理

(1) 样品提取:称取样品1~5g,加水100ml,沸水浴加热2h,冷却至室温,定容至200ml(V1),混匀后过滤,弃初滤液,收集余下滤液。

(2) 沉淀高分子物质:准确吸取上述滤液100ml(V2),置于烧杯中,加热浓缩至10ml,冷却后,加入无水乙醇40ml,将溶液转至离心管中以3000rpm离心5min,弃上清液,残渣用80%乙醇洗涤3次,残渣供沉淀葡聚糖之用。

(3) 沉淀葡聚糖:上述残渣用水溶解,并定容至50ml (V3),混匀后过滤,弃初始滤液后,取滤液2.0ml(V4),加入2.5mol/L NaOH2.0ml,Cu应用溶液2.0ml,沸水浴中煮沸2mim,冷却后以3000rpm离心5min,弃上清液,残渣用洗涤液洗涤3次,残渣供测定葡聚糖之用。

(4) 测定葡聚糖:上述残渣用2.0mL 1.8mol/LH2SO4溶解,用水定容至100mL(V5)。准确吸取2.0ml(V6),置于25ml比色管中,加入1.0ml苯酚溶液,10ml浓硫酸,沸水浴煮沸2分钟,冷却比色。从标准曲线上查得相应含量,计算粗多糖含量。

5.2 标准曲线制备:

精密吸取葡聚糖标准应用液0.10,0.20,0.40,0.60,0.80,1.00,1.50,2.00ml(分别相当于葡聚糖0.01,0.02,0.04,0.06,0.08,0.10,0.15,0.20mg),补充水至2.0mL,加入苯酚溶液1.0ml,浓硫酸10ml,混匀,沸水浴2分钟,混匀,沸水浴2分钟,冷却后用分光光度计在485nm波长处以试剂空白溶液为参比,测定吸光度值(A),以葡聚糖浓度为横坐标,A为纵坐标绘制标准曲线。

6.计算

从标准曲线上查得样品相应含量,计算粗多糖含量。

7.注意事项

(1) 苯酚-H2SO4溶液可以和多种糖类进行显色反应,常用于总糖的测定。所以测定过程中应注意容器及试剂中其他糖类的干扰。

(2)苯酚-H2SO4溶液和不同类的糖反应,显色的强度略有不同,反映在标准曲线的斜率不同。如果已知样品中糖的结构,应尽量以同类糖的纯品做标准品,或以含有已知浓度的同类产品做对照品进行检测分析;如果样品中糖的类型未知或结构多样,则只能以葡萄糖计或其他糖计报告结果。

(3) 试验证明葡萄糖、果糖等单糖,蔗糖、乳糖等双糖、低聚糖--棉子糖,淀粉、糊精等多糖及甜味剂糖精不干扰粗多糖测定。

(4) 本方法由北京市卫生防疫站建立,经中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所验证。


粗多糖检测标准(部分)


  NY/T 1676-2008 食用菌中粗多糖含量的测定


  SN/T 4260-2015 出口植物源食品中粗多糖的测定 苯酣-硫酸法


检测报告作用


  1.用作销售报告:出具正规第三方检测报告让客户更加信赖自己的产品质量,让自己的产品更具有说服力;


  2.研发使用:拥有优秀的检测工程师和先进的测试设备,可降低了研发成本,节约时间;


  3.司法服务:协助相关部门检测产品,进行科研实验,为相关部门提供科学、公正、准确的检测数据;


  4.大学论文:科研数据使用;


  5.投标:检测周期短,同时所花费的费用较低,准确性较高;


  6.工业问题诊断:较短时间内检测出产品问题点,以达到尽快止损的目的。


粗多糖检测流程


  1、联系/咨询工程师,寄样


  2、免费初检(确定后续检测项目)


  3、工程师根据样品及客户需求进行报价


  4、双方确定,签订保密协议,开始实验


  5、完成实验(检测周期:根据样品及其检测项目/方法会有所变动,可咨询工程师)


  6、出具检测报告,后续有任何问题可随时咨询


以上文章内容为部分列举,更多检测需求及详情免费咨询机构在线顾问:19121017521(电话及微信),做检测上百检网-出具权威检测报告具有法律效力。


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